investigacion # 5

Salmonelosis:
Los signos y síntomas de una infección por salmonela aparecen generalmente 12 a 72 horas después de que los microbios entran en su cuerpo. Usted puede tener cualquiera de lo siguiente:· Dolor tipo cólico en el abdomen (estómago).
·Diarrea (evacuaciones flojas) que pueden tener
sangre.
·Fiebre o dolor de cabeza.
·Náusea (malestar estomacal) o vomito (devolver).
·Pérdida de peso o deshidratación (perder demasiado líquido)

Tifoidea:
La fiebre tifoidea esta caracterizada por fiebre alta constante (40º), sudoración profusa, gastroenteritis y diarrea. Menos comúnmente puede aparecer un sarpullido de manchas aplanadas de color rosáceo. Tradicionalmente se divide en cuatro fases, durando cada una de ellas una semana aproximadamente.Primera semana: Durante esta fase sube lentamente la temperatura con una bradicardia relativa, malestar general, dolor de cabeza y tos. Se ha observado Epistaxis en una cuarta parte de los casos. Hay leucopenia con eosinopenia y linfocitosis relativa.Segunda semana: Durante esta fase se produce la postración. Llegando la fiebre al culmen de los 40º C. Hay bradicardia con un pulso dicrótico. El delirio es frecuente (este delirio le da a la Fiebre Tifoidea el nombre de fiebre nerviosa). En un tercio de los pacientes se han observado puntos rojos en la parte inferior del pecho y abdomen. Hay respiración agitada. El abdomen esta distendido y dolorido en cuadrante derecho inferior. La diarrea puede también ocurrir en esta fase (6 - 8 deposiciones por día), de apariencia verde y olor característico con apariencia de puré de guisantes. No obstante el estreñimiento también es frecuente. El Bazo e hígado están inflamados con un aumento del nivel de transaminasas.Tercera semana: En esta semana si la fiebre tifoidea no se trata, las complicaciones son frecuentes: Hemorragias Intestinales debidas a la congestión de las Placas de Peyer (serias pero no necesariamente mortales); Perforación intestinal en el Íleon que puede dar lugar a peritonitis abscesos que pueden derivar en encefalitis, colecistitis, y endocarditis. La fiebre es alta.Finales de Tercera semana/Principios de la cuarta: La temperatura corporal se va restableciendo, pero el debilibitamiento aun persiste

Brucelosis:
Sintomatología inicial es fiebre, cefalea, dolor vertebral con afectación de las articulaciones sacroilíacas y adenopatías (inflamación de los ganglios) en el 50% de los afectados. En casos más graves puede producir endocarditis y neumonía. La fiebre suele subir durante la noche y disminuir durante el día, con períodos de oscilación (de ahí que se dé el nombre de fiebre ondulante a la enfermedad).

material practica 9

Pre analíticaMateriales:
1.-Tubo de ensaye con tapón morado
2.-Placa de porcelana excavada
3.-Wiltrobe
4.-Vasal
5.-Centrifuga
6.-Pipeta Pasteur y lóbulo
7.-Palillos de madera
8.- Torundas de algodón alcoholizadas
9.-microcentrifuga
10.-papel secante y para mesa de laboratorio
11.- GradillasReactivos:
1.- Tipificadores A, b, d
Tipo sanguíneo
Prueba de aglutinación en sangre (objetivo)

meterial practica 8 !!

AglutinaciónMateriales
1.-Lámina de cristal para reacciones febriles
2.-Tubo de ensaye con tapón rojo estéril
3.-Palillos de madera 2 o 3 por cada uno
4.-Torundas de algodón
5.- Centrifuga
6.- Microscopio
7.-Pipeta Pasteur con lóbulo
8.- Papel secante
9.- Papel para mesa de laboratorio
10.- Torniquete
11.-GradillasReactivosFebriclinHO AB Bruc. Proteus 0x19º º
º º“Paciente” “sangre fresca”
Hoja de solicitud de examen Solicitud para examen de laboratorioIndicaciones del laboratorio para el paciente
Folio del registro“Inmunología” (portada del libro) con 3 bacterias:Salmonella, Brucella y ProteusAnalítica
1.- Técnica de extracción de sangre(Venopunción)
2.- separación del paquete sanguíneo y plasma
3.-Punteo de plasma en placa de cristal
4.-Mezclar plasma con reactivo de Febriclin para observar la reacción de aglutinación
5.-Observar macroscópicamente la laminilla a tras luz
6.-observar microscópicamente el proceso de aglutinación en objetivo 10x y 40x
7.-Reportamos en hoja de laboratorio:
Nombre del laboratorio, dirección, datos del paciente: nombre, edad, peso
Para Dr.
Tífico H= +- (positivo o negativo)
Tífico O= +-
Paratífico A=+-B
Brucella abortus= +-
Proteus 0x19 =+-

tinciones !!

Tincion
Los procedimientos que ponen de manifiesto diferencias entre las células bacterianas o en partes una célula se conoce como técnica de coloración diferenciales. Son algo mas que elaboradas que la técnica simple en la que las células se someten a una sola solución colorante o reactivo colorante.Las tinciones se combinan químicamente con el protoplasma bacteriano; si la célula no ha muerto el proceso termina de hacerlo. El método, por consiguiente, es bastante drástico y puede producir artificios.

Clasificcion de tinciones:
Tincion directa: En una tinción directa el colorante interacciona directamente con el sustrato.
Tinción indirecta: En una tinción indirecta se hace interaccionar en primer lugar a una sustancia química denominada "mordiente" con el sustrato la cual permite la posterior interacción del colorante. Usualmente los mordientes son sales, hidróxidos o alumbres de metales bivalentes o trivalentes.

Tinción por azul de metileno o cristal violeta: El azul de metileno es un buen colorante simple que actúa sobre todas las células bacterianas rápidamente y que no produce un color tan intenso que oscurezca los detalles celulares. Es especialmente útil para detectar la presencia de bacterias en muestras naturales, puesto que la mayor parte del material no celular no se tiñe.

Tinción de Gram: La tinción de Gram o coloración Gram es un tipo de tinción diferencial empleado en microbiología para la visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas. Debe su nombre al bacteriólogo danés Christian Gram, que desarrolló la técnica en 1884. Se utiliza tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana como para poder realizar una primera aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose Bacteria Gram positiva a las bacterias que se visualizan de color violeta y Bacteria Gram negativa a las que se visualizan de color rosa.

Tinción de Ziehl Neelsen: La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tinción diferencial rápida y económica, para la identificación de mocroorganismos patógenos, por ejemplo M. tuberculosis.Fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes, Franz Ziehl (1859 to 1926), un bacteriólogo y Friedrich Neelsen (1854 to 1894), un patólogo.Este método se basa en que las paredes celulares de ciertos parásitos y bacterias contienen ácidos grasos (por ejemplo, el ácido micólico) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos. Por esto se denominan bacilos ácido-alcohol resistentes o BAAR. Las micobacterias como M. tuberculosis y M. marinum y los parásitos coccídeos como Cryptosporidium se caracterizan por sus propiedades de ácido-alcohol resistencia. La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras.

medios de cultivo

concepto de medio de cultivo:


solucion que cuanta con los nutrientes necesarios para recuperar, multiplicar, aislar e identificar los microorganismos(bajo condiciones favorables de temperatura y pH), asi como para efectuar pruebas de suceptibilad. generalmente se presentan en forma de polvo fino o granular antes de ser preparados, al presentarse podemos encontrarlos en estado solido, semisolido y liquido.





* se clasifican en:


1.- segun su aspecto:


-fosiferoliquidos


- semi-solidos


-solidos duros o muy duros





2.-segun su uso:


-selectivos


-selectivos de enriquesimiento


-diferenciales


-para cultivar germenes anaerobios


-para medir potencia de antibioticos


-para transporte en micro


-para filtracion atraves de hongos y levaduras


-para cultivos de protozoarios





tipos de siembra en medio de cultivo:


*siembra de inoculo en placa:


1) tecnica de barry:para ello en el medio de cultivo previamente fundido en tubo se le añade el inoculo, se hemogeiniza, se vierte en la placa petri y se deja solidificar.

2)siembra de muestra liquida en placa con asa de drigaslsky: consiste en distribuir la muestra de manera uniforme por la superficie del medio de cultivo contenido en la placa. para ello adicionamos al medio solido un inuculo liquido

3)siembra por agotamiento o aislamiento en estria: se tomara con el asa de siembra una cantidad adecuada depositando el inoculo en uno de los extremos superiores la placa, se realizara movimientos en zig-zag sin levantar el asa hasta concluir la siembra en toda la placa.

4)siembra de los cuatro cuadrantes:con un rotulador dividimos la placa en cuadrantes iguales. con el asa extendemos por cada cuadrante el inoculo haciendo zig-zag sin flamear. finalmente observaremos como en el ultimo cuadrante las colonias se encuentran aisladas o separadas.

5)tecnica de los tres giros: se rotula la placa de forma analoga con el asa de platino y se siembra por estria la mitad superior de la placa. sin flamear giramos 90º y volvemos a sembrar ( asi hasta 3 veces)

6)siembra por estria en tubos con medio solido inclinados: con el asa de siembra se añade al tubo una cantidad de muestra realizando movimientos ascedentes en zig-zag.

7)siembra por picadura: con hilo de siembra introducir el asa en el medio de cultivo hasta el fondo en la zona central de este.

*paramesium *caracterizticas:

-caracterizticas del microorganismo denominado paramesium:
organizmo unicelular de vida libre, cubierto de cilios, los cuales son pequeñas extenciones moviles que utilza para desplazarse y para alimentarse. los paramesium se utilizan en algunos estudios anatomicos y geneticos.

.-caracterizticas de :
a) escherichia colin:
es quiza el organismo procarionte mas estudiado por el sr humano, se trata de una bacteria que se encuentra generalmente en los intestinos animales y por ende en las aguas negras. son necesarias para el funcionamiento correcto del proceso digestivo, ademas produce vitaminas B y K. es un bacilo que reacciona negativamente a la tincion de gram, es anaerobico facultativo, movil por flagelos peritricos, no forma esporas, es capas de fermentar la glucosa y su prueba de IMVIC es ++-.

b)salmonella:
formado por bacilos gramnegativos, anaerobios facultativos, con flagelos peritricos y no desarrollan capsula ni espora. son bacterias moviles que producen sulfuro de hidrogeno. fermentan glucosa por poseer una enzima especializada, pero no lactosa y no producen ureasa.

c)proteus:
patogenos responsables de muchas infecciones del tracto urinario. normalmente no fermentan lactosa por razon de tener una galoctosidasa, tienen a ser organismos pleomorficas , no esporulados ni capsulados y son productoras de fenilalanina desaminasa.

d) brucella abortus:
es una zoonosis ampliamente distribuida a nivel mundial que afecta principalmente al ganado bovino, causando esterilidad en machos y abortos en hembras en gestacion.

pie de rey (vernier)

1.-es un instrumento para medir dimenciones de objetos relativamente pequeños. se atribuye al cosmografo y matematico portugues que se llama:

pierre vernier

2.-en que año se le atribuye el pie de rey al cosmografo y matematico portugues:
(1492-1577)

3.-tambien se ha llamado pie de rey al:
vernier

4.-en que año se le atruibuye el pie de rey al geometra pedro vernier:

(1580-1637)

5.-que otro nombre recibe el origen del pie de rey?
nonio-nonius, vernier

1. Mordazas para medidas externas.
   
2. Mordazas para medidas internas.
   
3. Coliza para medida de profundidades.
   
4. Escala con divisiones en centímetros y milímetros.
   
5. Escala con divisiones en pulgadas y fracciones de pulgada.
   
6. Nonio para la lectura de las fracciones de milímetros en que esté dividido.
   
7. Nonio para la lectura de las fracciones de pulgada en que esté dividido.
   
8. Botón de deslizamiento y freno.

practica III (pipeteo)

OBJETIVO:
el alumno tecnico en laboratorio clinico aprendera a pipetear correctamente y asi no tomar de la muestra que se quiere , tambien se medira la cantidad deseada con la ayuda de una probeta.

INSTRUCCIONES:
dentro del procedimiento se va a llevar a cabo la actividiad de pipetear y medir el liquido señalado.
el pipeteo debe ser de una forma ordenada y para ello se ocupa una probeta donde se depositara el liquido indicado INDIVIDUALMENTE!!.

antes de hacer bada se debe recibir cuidadosamente el material y verificar que no este en mal estado, para ello se debe llenar una forma de laboratorio de solicitud de materiales.

MARCO TEORICO (actividad)
llegamos al laboratorio con el equipo de bioseguridad ya puesto.
se nos entrego el material que utilizariamos el cual fue:

• probeta
• caja petri
• pipeta de thomas
• pipeta automatica
• pipeta
• pipeta
• pipeta

se empezo esta practica con cada uno de los integraantes de equipo, pero antes se nos separo en dos grupos para asi tener un mejor desempeño.

la idea de esta practica fue aprender a succionar el agua para no tragarnosla y saber si la medida que succionabamos era la deceada.

lo suguiente que hizimos fue con la pipeta de thomas agarrar una gota y ponerla en una caja petri para luego succionarla con la pipeta automatica y poder saber si la medida de una gota de agua son 10 microlitros.

luego las gotas las comparamos para ver con nuestros propios ojos que son iguales.

practica II (pesos y medidas)

OBJETIVO:
el alumno tecnico en laboratorio clinico aprendera a peasr y medir adecuadamente con la balanza granataria los materiales de criztaleria usados en las diferentes areas del alboratorio, teniendo como finalidad saber sus diferentes pesos al hacer un medio de cultivo o cualquier utra cosa.

INSTRUCCIONES:
dentro del procedimiento se va a llevar acabo la actividad de pesar y medir los materiales de cristaleria asi como las sustancias, solventes y otro tipo de reactivos que se soliciten.
Los pesos y medidas deben de ser en forma ordenada y para ello se ocupa una balanza granataria donde se depositaran materiales ya indicados de forma individual registrando los pesos de cada uno.
una vez teniendo los pesos de los materiales se le aplicara un reactivo, ya sea solido, polvo o liquido y se registrara el peso con el reactivo y asi poder llegar a ocupar nuestro sistema metrico decimal y anglosajon.

antes de hacer nada se debe resibir cuidadosamente el material y verificar que no este en mal estado. Para ello se debe llenar una forma de laboratorio de solicitud de materiales.

MARCO TEORICO:
llegamos al laboratorio de quimica a las 8:00 de la mañana, entramos y nos pusimos nuestro equipo de bioseguridad (bata, guantes, cubrebocas,gorro).
primero, el profesor nos dio las indicaciones.
empezando por explicar la razon del equipo de bioseguridad.
nos llamo mesa por mesa para entregarnos el equipo de cristaleria:

• pipeta pasteur
• pipeta de sally
• vaso de presipitado
• lamina escabada
• tubos de ensayo
• probeta graduada 20º
• pipeta volumetrica 20º
• pipeta graduada 010 ml
• pipeta graduada 20º/1.00 ml
• caja petri
• vidrio de reloj
• balanza
• espatula

y empezamos midiendo cada uno de ellos con la balanza granataria

1. espatula - 49.2 gr
2. pipeta pasteur - 2.4 gr
3. vaso de presipitados - 4 gr
4. lamina escabada - 21.5 gr
5. tubo de ensayo - 7.2 gr
6. probeta graduada 20º - 134.4 gr
7. pipeta volumetrica 20º - 21.4 gr
8. pipeta graduada 010 ml - 14.6 gr
9. pipeta graduada 20º/1.00 ml
10. caja petri - 84.8 gr
11. vidrio de reloj - 17.2 gr

cuando terminamos de medir cada material, medimos el agua y la sal que dieron; para medirlo tuvimos que usar los materiales ya medidos y restamos el esultado obtenido con el resultado que ya teniamos.

• caja petri c/sal : 64.72 gr
• agua en el cristalizador : 90.7 gr
• gota de agua en lamina escabada : 21.51 gr
• papel con sal : 21.2 gr

RESULTADOS:

• agua: 90.7gr - 84.8 gr = 5.9 gr
• gota de agua : 21.51gr - 21.5gr = 0.01 gr
• sal: 21.2 gr - 0.04 gr = 21.16 gr

el profesor nos dio sal simulando un medio de ccultivo y nos pidio que con esta sacaramos cuatro cajas petri:

*medio de cultivo: agar dextrosa y papa = 39 gr -->1 lt

caja petri: 19 ml

39 gr ---> 1000 ml

X gr ---> 19 ml

X= (39 gr * 19 ml) /1000 ml = 0.741

para cuatro cajas: 2.964 gr de agar dextrosa y papa

actividad en clase...

I.- realizar los problemas correspondiantes al medio de cultivo (reactivo)

1.-anotar el nombre del medio de cultivo que se nos facilita, con todos los datos visibles en su etiqueta:
medio de cultivo:- agar de mueller hinton (pruebas de sensibilidad a antibioticos y cultivo de neisseria)
hecho por: DIBICO SA. DE CV.
*agente de diagnostico*
Reg.NO.01700R84SSA
contenido neto: 450 gr
No. lote: 6620035
caducidad: 1/mar/2007
catalogo:No. 1021-A

2.-leer cuidadosamente las indicaciones que contiene el bote del medio de cultivo.

3.- rehidratar el contenido para 1000 ml, del cual debera ocupar un porcentage para rehidratar en 250ml, 175ml y 138ml.

4.-las operaciones deben de ser con numeros basicos como +,-, / y multiplicacion.

*OPERACIONES:
1000 ml ---> 38 gr
250 ml ---> X gr

X= (250 ml * 38 gr)/1000 ml = 9.5 gr
__________________________________________________
1000 ml ---> 38 gr
175 ml ---> X gr
X=(175 ml * 38 gr)/1000 ml =6.65 gr

__________________________________________________
1000 ml ---> 38 gr
138 ml ---> X gr
X=(138 ml * 38 gr)/1000 ml=5.244 gr

camara de neubauer (recuento de eritrocitos)

Observe que en la grilla de la cámara de Neubauer las áreas de recuento de eritrocitos y linfocitos son diferentes. Los glóbulos rojos se cuentan en las áreas coloreadas de rojo, mientras que los glóbulos blancos se cuentan en las áreas coloreadas de azul. Ten en cuenta que la grilla central tiene 25 cuadrados de 1mm x 1mm de área y 0.10 mm de profundidad. El factor de dilución es por tanto de 1:200. Convierte el número de glóbulos rojos contados en 5 cuadrados a nº glóbulos rojos/µl. (1 µl (microlitro) = 1 mm3 )

La imagen de abajo simula el campo que esta viendo al microscopio con un objetivo de 45x. Solo es visible el centro de la grilla. Intenta verificar esto al ir moviendo el campo de derecha-izquierda y de arriba-abajo, como si de una pletina de microscopio se tratase. Cuenta los glóbulos rojos en los cinco cuadrados mencionados anteriormente y determina el recuento de eritrocitos como se ha descrito anteriormente.. Muy importante: Cuando un eritrocito se sitúa en mitad de las líneas superior y/o de la izquierda, entonces es contabilizado. Pero no se contabiliza cuando se sitúa en mitad de las líneas inferior y/o de la derecha..

El rango normal de recuento de glóbulos rojos es el siguiente:

Mujeres:
3.9-5.6 millones/µl
Hombres:
4.5-6.5 millones/µl

TÉCNICAS DE CONTAJE CELULAR
Una suspensión celular se caracteriza por presentar un número de partículas microscópicas dispersas en un fluido. Habitualmente será necesario determinar tanto la densidad de las células en la suspensión como el porcentaje de éstas que son viables.
Para determinar la densidad de las células se emplean diferentes técnicas, desde la relativamente simple cámara de contaje celular de la que existen numerosas variantes, entre ellas la que empleamos (cámara de Neubauer), hasta equipos automáticos de contaje celular como el "Cell Coulter" de la empresa Beckman-Coulter.

El principio del contador celular se basa en la medida de los cambios en la resistencia eléctrica que se producen cuando una partícula no conductora en suspensión en un electrolito atraviesa un pequeño orificio. Como se puede ver en el esquema, una pequeña abertura entre los electrodos es la zona sensible a través de la que pasan las partículas que se encuentran en suspensión. Cuando una partícula atraviesa el orificio desplaza su propio volumen de electrolito. El volumen desplazado es medido como un pulso de voltaje. La altura de cada pulso es proporcional al volumen de la partícula. controlando la cantidad de la suspensión que circula a través del orificio es posible contar y medir el tamaño de las partículas. Es posible contar y medir varios miles de partículas por segundo, independientemente de su forma, color y densidad.

En la unidad de Citometría de flujo y Microscopia Confocal de los Servicios Científico-Técnicos de la Universidad de Barcelona se dispone de contadores celulares.Sin embargo, es posible determinar la densidad celular empleando métodos más sencillos. Nos basta con una cámara de contaje celular, por ej. la cámara de Neubauer, y un microscopio. Una cámara de contaje celular es un dispositivo en el que se coloca una muestra de la suspensión a medir. El dispositivo presenta unas señales que determinan un volumen conocido (x microlitros). Al contar bajo el microscopio el número de partículas presentes en ese volumen se puede determinar la densidad de partículas en la suspensión de origen.

La cámara de Neubauer es una cámara de contaje adaptada al microscopio de campo claro o al de contraste de fases. Se trata de un portaobjetos con una depresión en el centro, en el fondo de la cual se ha marcado con la ayuda de un diamante una cuadrícula como la que se ve en la imagen. Es un cuadrado de 3 x 3 mm, con una separación entre dos lineas consecutivas de 0.25 mm. Así pues el área sombreada y marcada L corresponde a 1 milimetro cuadrado. La depresión central del cubreobjetos está hundida 0.1 mm respecto a la superficie, de forma que cuando se cubre con un cubreobjetos éste dista de la superficie marcada 0.1 milímetro, y el volumen comprendido entre la superficie L y el cubreobjetos es de 0.1 milímetro cúbico, es decir 0.1 microlitro.

Si contamos las cuatro áreas sombreada (L) observando un total de x células entre las cuatro áreas, la concentración en la suspensión celular será :
concentración en la suspensión (células / mL) = 10000 (x/4)

En la imagen puedes observar el aspecto de una de las regiones marcadas como L y que en el microscopio se ven como una cuadrícula de 16 pequeños cuadrados de 0.25 milímetros de lado. Esta imagen ha sido tomada empleando un microscopio invertido de contraste de fases

Existen numerosos modelos de cámaras de contaje celular adaptadas a su uso en microscopía. En la imagen puedes observar una cámara de Neubauer doble, como las que usas en el laboratorio de prácticas.

Para determinar la viabilidad celular se emplean diferentes métodos. El más común es el de tinción con azul tripán. El azul tripán es un coloide que se introduce en el interior de las células que presentan roturas en la membrana. Así pues las células que aparecen en la imagen, claramente de color azul, son consideradas no viables. Asimilar células blancas, por exclusión, a células viables es un error pues por este método se sobrevalora la viabilidad de las células en la suspensión, determinando como inviables sólo aquellas con la membrana rota. Existen otros métodos de determinación de la viabilidad celular como el más preciso de la tinción con ioduro de propidioEn la red dispones de descripciones detalladas sobre como utilizar un hemocitómetro, como la propuesta por P.J. Hansen, o la detallada descripción que aporta Beckton-Dickinson, y los problemas de cálculo de parámetros celulares que plantea empleando datos obtenidos a partir de un hemocitómetro, y otros protocolos para el contaje de células

1.se aseptiza el dedo con alcohol y luego se seca al aire o con algodón. Se coge entre el pulgar y el índice y se hace una punción rápida y penetrante a través de la piel de la punta del dedo con una lanceta estéril.
2. Se deshecha la primera gota de sangre y se aspira la siguiente con la pipeta de dilución perfectamente limpia y seca hasta la señal 1 o 0.5 (también puede utilizarse la pipeta de hemoglobina, de 20 microlitros). Hay que evitar la entrada de burbujas de aire, pudiendo ayudarnos de un papel de filtro para conseguir el enrasado.
3. A continuación se toma con la pipeta líquido de Hayem, isotónico con la sangre, hasta la señal 1; así, la sangre queda diluida al 1/10, si tomamos sangre hasta la señal 1, o al 1/20 si tomamos hasta 0.5. Esto es así porque el volumen de la bola de la pipeta es 100 veces superior al del capilar de la misma. (Si hemos utilizado la pipeta de hemoglobina podemos diluir su contenido en 2 o 4 ml de líquido de Hayem para obtener diluciones 1/100 o 1/200).
4. Tomamos la pipeta (o el tubo de ensayo) entre los dedos índice y pulgar y agitamos. A través de la goma de conexión con la pipeta, soplamos para despreciar las primeras gotas por corresponder al líquido que estaba en el capilar.
5. Se adapta un cubreobjetos sobre una cámara cuentaglóbulos limpia y seca y se coloca una gota en uno de los lados del cubre; esta gota penetra por capilaridad y rellena el retículo de la misma.
6. Una vez preparada la cámara se coloca sobre la platina del microscopio dejándose unos minutos en reposo para que sedimenten los glóbulos. Disponemos el condensador bajo y luz débil; enfocamos primero con el objetivo débil seco y luego se cambia al fuerte seco para proceder al recuento, que se lleva a cabo en los cuadrados pequeños del retículo marcado en color rojo. Finalizado el recuento se procede a la limpieza de la pipeta con acético 1:3, agua destilada y alcohol-éter sucesivamente.

7.El volumen de sangre en el cual se han contado las células resulta de multiplicar la profundidad de la cámara por el factor de dilución, la superficie de los cuadrados y el número de cuadrados contados.
Con cámara de NEUBAUER: Superficie de 1 cuadrado grande (1/20 mm de lado):
Volumen de un cuadrado grande (1/10 mm de profundidad):

Si contamos "a" glóbulos rojos en "n" cuadrados pequeños, el número de glóbulos por cuadrado será a/n.
Si en un volumen 1/4000 mm3 hay a/n glóbulos rojos, en 1 mm3 habrá X. Luego:
siendo X el número de glóbulos rojos existentes por cada mm3 de sangre diluida. Si la sangre se diluyó a 1/100 o 1/200, habrá que multiplicar el valor X por 100 o 200 respectivamente, con lo cual obtendremos un nuevo valor, Y, que representa el número de glóbulos rojos existentes por cada mm3 de sangre (sin diluir).

Se utilizan para calcular, mediante el uso del microscopio, el número de partículas (leucocitos, hematíes, bacterias…) por unidad de voluimen de un líquido.
La cámara está constituida por una placa base de vidrio especial pareciso a un porta, su parte central se encuentra separada de los extremos por unas ranuras. en ella se encuentran las cuadrículas de recuento.
La fórmula de contaje es: partículas/mm3= partículas contadas.
Clases de cámaras:
- Neubauer improved: Es el más utilizado (9 cuadros grandes, cada 1 de 1 mm2.)
- Neubauer: La diferencia es el cuadro grande central.
- Thoma: Se utiliza solo para el recuento de eritrocitos.
- Fuchs-Rosenthal: Se utiliza habitualmente para recuento de células en líquidos orgánicos (LCR, Líquido sinovial…)

pruebas serlogicas

es un examen de liquido seroso de la sangre que se utiliza para detectar la presencia de anticuerpos contra un microorganismo.

*temas centrales de pruebas serologicas:

• identificar anticuerpos (proteinas hechas por clases de globulos como respuesta a un antigeno, una proteina extraña en el cuerpo)
• investigar los problemas del tejido sistema inmunologico, como las enfermedades autoinmunologicas (cuando el sistema inmunologico del cuerpo ataca a sus propios tejidos) y los transtornos de inmunodeficiencia (cuando el sistema inmunologico del cuerpo no esta lo suficiente activo)
• determina la compatibilidad de la sangra para transfuciones.

*reacciones febriles:

son un grupo de pruebas de aglutinacion que investigan la presencia en el suero del paciente, de anticuerpos contra cepas bacterianas patogenas que causan la fiebre de tifiodea, paratifoidea y brucelosis.

*pruebas de embarazo:

Hay dos tipos: en sangre y en orina.Una prueba de embarazo en sangre puede detectar la HCG más o menos 10 días después de la fecundación, incluso antes del retraso de la menstruación. En la orina, la hormona tarda un poco más en manifestarse y es necesario esperar cinco o nueve días luego de la fecha en que debería haber llegado el periodo, teniendo en cuenta que la mujer tenga ciclos regulares.Para la prueba en sangre se extrae una muestra del líquido y se deposita en un tubo para su posterior análisis. En cuanto a las pruebas de orina, por lo general se recogen unas gotas para ponerlas en un lugar determinado.

*Apunte :]

iniciamos nuestra practica con la utilizacion de equipo de cristaleria en el termino de pipetas graduadas para realizar la actividad demandada de medicion de liquidos (volumen) de 1ml hasta 5ml.

en la cubeta para rotar de equipo cientifico llamado monarca se hace un baceado en cifra de microlitros (20 microlitros) y se utiliza la pipeta automatica graduada que en forma manual aplicamos la graduacion.

con la misma pipeta graduada se toma una muestra de liquido y se deposita en el vidrio de reloj y se compara contra la cubeta del rotor.

se comparan las medidas con todas las pipetas y los integrantes de la mesa deben de realizar la actividad de pipeteo.

*lamina de cristal para pruebas serologicas(inmunologia).
su caracteriztica es excabada y algunas solo tienen un circulo plastico para contener el liquido que se deposite en el.
la pipeta pasteur la ocupamos con su lobulo de extraccion se utiliza para el conteo de la lamina de cristal.
NOTA:
borrador de la actividad de cada practica.

* celulas *camara de neubauer

*CAMARA DE NEUBAUER:
es un instrumento utilizado en cultivo celular para realizar conteo de celulas en un medio de cultivo liquido. consta de 2 placas de vidrio, entre ellas se puede alojar un volumen conocido como liquido.
una de las placas posee una gradilla de dimenciones conocidos y que es visible al microscopio optico.
para contar las celulas de un cultivo liquido, se agrega una gota de este entre estas dos caoas y observar el microscopio optico la cantidad de celulas presentes en un campo determinado de la gradilla.

*CELULAS DE LOS TOMATES:
grandes celulas esfericas u ovoides, en cuyo citoplasma puede verse granulaciones enaranjadas que son los cromoplastos.
tambien puede verse grandes vacuolas incoloras en celulas menos alteradas en el nucleo.

*CELULAS DE LAS CEBOLLAS:
estan pueden ser vacuolas o bien burbujas de aire. celulas de catatilo de cebolla.

moleculas inorganicas

los minerales inorganicos son necesarios para la reconstruccion estructural de los tejidos corporales, ademas de que participan en procesos tales como la accion de los sistemas enzimaticos, contraccion muscular, reacciones nerviosas y coagulacion de la sangre. estos nutrientes minerales, que deben ser suministrados en la dieta, se dividen en dos clases:

• macroelementos:
• calcio
• fosforo
• magnesio
• sodio
• hierro
• yodo
• potasio

• microelementos:
• cobre
• cobalto
• manganesio
• fluor
• zinc

no contienen enlaces cobalentes carbono-carbono o carbono-H

EL AGUA:

consiste en un atomo de oxigeno y dos de hidrogeno unidos. El agua es un disolvente(liquido en el cual se disocian los solutos), que forman soluciones acuosas en el organismo. Participa en las reacciones quimicas:

• sintesis por deshidratacion:

reaccion quimica en el cual se elimina el agua de moleculas pequeñas para poder unirlas y formar una molecula mas grande.

• hidrolisis:

reaccion quimica en el cual se añade agua a las subunidades de una molecula grande para romperla en moleculas de menor tamaño.

• las reacciones quimicas siempre implican una transferencia de energia, como cuando se utiliza energia para sintetizar las moleculas de AYP
• las ecuaciones quimicas nos muestran como los reactivos interaccionan para formar productos; las flechas separan los reactivos de los productos.

ACIDOS, BASES Y SALES:

las moleculas de agua se disosian para generar el mismo numero de H+ (hidrogeniones) y OH-(iones hidroxilo)

• acidos:

sustancias que desplaz a el equilibrio H+/OH- a favor del primero; opuesto a base.

• base:

sustancia que desplaza el equilibrio H+/OH- a favor del segundo; denominada tambien alcali; opuesto al acido.

• pH:

expresion numerica de la concentracion relativa de hidrogeniones en una solucion acuosa.

*el pH 7 se considera neutro

*el pH superior a 7 se denomina basico; el Ph inferior a 7 es acido

1. la neutralizacion sucede cuando se mezclan acidos y bases para formar sales.
2. los tampones son sistemas quimicos que absorben el exeso de acido y bases y mantienen en este modo un pH relativamente estable.